在做檢測時,有不少關于“高效液相色譜檢測器有哪幾種”的問題,這里百檢網給大家簡單解答一下這個問題。
高效液相色譜檢測器種類包括:紫外-可見光檢測器、熒光檢測器、電化學檢測器、質譜檢測器、蒸發光散射檢測器、折光指數檢測器、激光光散射檢測器等。本文將詳細介紹這幾種常見的高效液相色譜檢測器:
高效液相色譜檢測器類型一覽
1、紫外-可見光檢測器
紫外-可見光檢測器是HPLC中最常用的檢測器之一。通過測量樣品在紫外或可見光區域的吸光度來實現對組分的檢測。紫外-可見光檢測器具有靈敏度高、線性范圍寬、操作簡便等優點,用于蛋白質、核酸、有機化合物等的分析。
2、熒光檢測器
熒光檢測器通過測量樣品在激發光照射下產生的熒光信號來實現對組分的檢測。熒光檢測器具有高靈敏度、選擇性強等優點,特別適用于那些在紫外-可見光區域沒有明顯吸收的化合物,如某些生物分子、有機染料等。熒光檢測器用于生物分析、藥物分析等領域。
3、電化學檢測器
電化學檢測器通過測量樣品在電極表面發生的氧化還原反應產生的電流信號來實現對組分的檢測。電化學檢測器具有靈敏度高、選擇性強、響應速度快等優點,特別適用于那些具有電活性的化合物,如某些有機化合物、金屬離子等。電化學檢測器用于在環境監測、藥物分析等領域。
4、質譜檢測器
質譜檢測器通過測量樣品離子的質荷比來實現對組分的檢測。質譜檢測器具有高靈敏度、高選擇性、信息豐富等優點,可以提供化合物的分子量、結構等信息。質譜檢測器在蛋白質組學、代謝組學、藥物分析等領域具有重要應用。質譜檢測器與HPLC的聯用,即液相色譜-質譜聯用(LC-MS)。
5、蒸發光散射檢測器
蒸發光散射檢測器通過測量樣品在蒸發過程中產生的光散射信號來實現對組分的檢測。蒸發光散射檢測器具有通用性強、對樣品的紫外吸收特性不敏感等優點,特別適用于那些在紫外-可見光區域沒有明顯吸收的化合物,如糖類、脂類等。蒸發光散射檢測器用于食品分析、藥物分析等領域。
6、折光指數檢測器
折光指數檢測器通過測量樣品在流動相中的折光指數變化來實現對組分的檢測。折光指數檢測器具有無破壞性、無需樣品預處理等優點,適用于那些對樣品有特殊要求的分析,如某些生物大分子、藥物制劑等。折光指數檢測器用于生物制藥、藥物制劑分析等領域。
7、激光光散射檢測器
激光光散射檢測器通過測量樣品在激光照射下產生的光散射信號來實現對組分的檢測。激光光散射檢測器具有高靈敏度、高分辨率等優點,特別適用于那些需要測量粒徑分布、分子量分布的樣品,如聚合物、蛋白質聚集體等。激光光散射檢測器運用于材料科學、生物技術等領域。
高效液相色譜檢測器使用注意事項
1、脫氣:HPLC系統內不希望有氣泡存在。常用的脫氣方法包括吹氦脫氣法、加熱回流法、抽真空脫氣法、超聲波脫氣法和在線脫氣法。
2、過濾:任何顆粒物進入HPLC系統都可能堵塞柱子,導致系統壓力增加和色譜峰變形。流動相、樣品和儀器系統部件的磨損物都需要過濾。
3、沖洗:保持HPLC系統的清潔。流動相儲液瓶、泵、自動進樣器、色譜柱和檢測器都需要定期沖洗。
4、流動相的選擇:流動相需要色譜純度,水應使用20mΩ的去離子水。脫氣后的流動相要小心操作,避免引入氣泡。
5、柱子的保護:色譜柱非常脆弱,第一次使用時應避免讓液體過柱子。所有過柱子的液體都需要嚴格過濾,以防止柱子堵塞。
6、壓力控制:壓力不能太大,最好不要超過2000psi。過高的壓力可能會損壞色譜柱和檢測器。
7、檢測波長的選擇:選擇波長時要考慮溶劑的截止波長,確保檢測波長大于溶劑的截止波長。
8、樣品處理:樣品在進樣前需要過濾,以防止顆粒物進入系統。